组织工程医疗产品+第9部分+透明质酸钠

ICS

ICS 11．040．40

C 45

、、’

中华人民共和国医药行业标准

YY／T 0606．9—2007

组织工程医疗产品

第9部分：透明质酸钠

Tissue engineered medical products--Part 9：Sodium hyaluronate

2007-01—31发布 2008—01_01实施

国家食品药品监督管理局 发布

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YY／T 0606．9—2007

目 次

前言 ·· ·· ···

1范围 · · [1

2规范性引用文件 ·· 1

3术语和定义 · · 1

4分类 ··· · ·· · ·· ·· 2

5要求 · · 2

6试验方法 ·· · 一 3

7检验规则· ···· · · · 5

8标志 ··· ····· · · · 5

9包装、运输和贮存 · · 6 附录A(规范性附录)透明质酸钠葡萄糖醛酸含量测定 ·· 7 附录B(规范性附录)透明质酸钠蛋白质含量测定 · · 9 附录c(规范性附录)透明质酸钠中乙醇残留量测定(顶空气相色谱法) 1 附录D(资料性附录)背景资料 · 3 参考文献 · 5

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刖 肓 YY／T 06066组织工程医疗产品》分为：

——第1部分：通用要求；

——第2部分：术语学；

——第3部分：通用分类；

——第4部分：皮肤替代品(物)的术语和分类；

——第5部分：基质及支架的性能和测试；

——第6部分：I型胶原蛋白；

——第7部分：壳聚糖；

——第8部分：海藻酸钠；

——第9部分：透明质酸钠；

——第10部分：修复或再生关节软骨的植入物体内评价；

——第12部分：细胞、组织、器官的加工处理指南；

——第13部分：产品保存；

——第16部分：活细胞或组织的海藻酸盐凝胶固定或微囊化指南。

　本部分为YY／T 0606的第9部分。

　本部分的附录A、附录B和附录c是规范性附录，附录D是资料性附录。

　本部分由国家食品药品监督管理局提出。

　本部分由中国药品生物制品检定所归口。

本部分起草单位：上海其胜生物材料技术研究所、中国药品生物制品检定所医疗器械检验中心。

　本部分主要起草人：顾其胜、黄治本、奚廷斐。

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组织工程医疗产品 第9部分：透明质酸钠

1范围

YY／T 0606本部分规定了用于外科植入物和组织工程医疗产品透明质酸钠的要求、试验方法、检 验规则、标志、包装、运输和贮存等要求。

本部分适用于透明质酸钠，透明质酸钠可以用于制备外科植人物和组织工程医疗产品。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过YY／T 0606的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。

GB 19l一2000包装储运图示标志(eqv IS0 780：1997)

GB／T 14518—1993胶粘剂的pH值测定(neq NET 76—103：1972)

GB／T 16886．1—2001医疗器械生物学评价第l部分：评价与试验(idt ISO 10993—1：1997) GB／T 16886．3—1997 医疗器械生物学评价第3部分：遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验(idt

lS0 10993 3：1992)

GB／T 16886．4—2003医疗器械生物学评价第4部分：与血液相互作用试验选择(ISO 10993—

4：2002，IDT)

GB／T 16886．5—2003 医疗器械生物学评价 第5部分：体外细胞毒性试验(ISO 10993—5：1999， IDT)

GB／T 16886．6一1997医疗器械生物学评价第6部分：植入后局部反应试验(idt ISO 10993 6：

1994)

GB／T 16886．10一2005医疗器械生物学评价 第10部分：刺激与迟发型超敏反应试验(ISO

10993—10：2002，IDT)

GB／T 16886．11 1997医疗器械生物学评价第11部分：全身毒性试验(idt ISO 10993—11：1993)

GB／T 16886．12—2005医疗器械生物学评价第12部分：样品制备与参照样品(ISO 10993 12：

2002，IDT)

YY／T 0313 1998医用高分子制品包装、标志、运输和贮存

YY 0466--2003医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号(ISO 15233：2000，IDT)

中华人民共和国药典(2005年版，二部)

3术语和定义

下列术语和定义适用于YY／T 0606的本部分。

3．1

透明质酸hyaluronic acid

透明质酸是一种由D一葡萄糖醛酸和●F乙酰基D一葡萄糖胺通过6-(1-3)糖苷键连接而成的双糖重 复结构单元组成的线性多糖。每个双糖单元通过p一(1—4)糖苷键与另一个连接起来。

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3．2

透明质酸钠sodium hyaluronate 透明质酸钠是透明质酸的钠盐形式，其结构单元分子量为401，分子结构式如下图所示。

　注：其他关于透明质酸的介绍请参见附录D。

CoONa CH20H

O

＼

H NHCOCH，

透明质酸钠的分子式(结构单元)

4分类 透明质酸钠按照原料来源和制备方法不同，可以分为组织提取型和细菌发酵型。

5要求

5．1 外观 白色或淡黄色粉末状或丝状固体，无任何肉眼可见异物。

5．2 傅里叶变换红外光谱(FT—IR)

透明质酸钠典型的FT IR频率(cm_1)有3 275～3 390(b)、1 615(s)、1 405(m)、1 377(ITl)、1 150、

1 077、1 045(s)、946(m)、893(w)。

　注：s：强的；m：中等的；w：弱的；b：宽的。

5．3 葡萄糖醛酸含量

≥40％(质量分数)。

5．4 pH值

0．5％浓度溶液的pH值为6．o～7．5。

5．5 特性粘数(分子量) 不同产品的特性粘数(分子量)应不低于其自身规定的标示值。

5．6 动力粘度 不同产品的动力粘度应不低于其自身规定的标示值。

5．7 蛋白质含量

≤0．1％(质量分数)。

5．8 重金属含量

≤10 pg／g(质量分数)。

5．9 乙醇残余量

≤400／-g／mg(质量分数)。

注：如在加工过程中使用了除乙醇之外的其他有机溶剂，应建立相应的检验指标和检验方珐。

5．10干物质含量

≥90％(质量分数)。

5．11灰分

≤lo％(质量分数)。

注：透明质酸钠分子上的钠盐占整个分子总量的5 7％。

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5．12紫外吸收

280 nm处OD值≤1．0；260 nm处OD值≤1．0。

5．13无菌试验 应无菌。

　注；如果透明质酸钠以非无菌的方式提供，则最终用户需进行灭菌处理以达到无菌要求。

5．14细菌内毒素限量

≤O．5 EU／mg。

　注：如果透明质酸钠以非无菌的方式提供，则最终用户需进行去除细菌内毒素的处理以达到细菌内毒素限量要求。

5．15原材料安全性

5．15．1 生物发酵法制备的透明质酸钠应进行溶血性链球菌溶血素试验，结果应无溶血环。

5．15．2组织提取法制备的透明质酸钠应进行相关的检验检疫，结果应合格。

5，16生物学性能

5．16．1总则

透明质酸钠应按照GB／T 16886．1的要求进行生物学评价，应不释放出对人体有不良作用的物质。

5．16．2细胞毒性试验 细胞毒性反应不大于1级。

5．16．3皮内反应试验 原发性刺激指数(PⅡ)不大于0．4。

5．16．4急性全身毒性 无急性全身毒性。

5．16．5溶血试验 无溶血反应。

5．16．6致敏试验 应无皮肤致敏反应。

5．16．7皮下植入试验

植入14 d后组织反应与阴性对照无显著差异。

5．16．8遗传毒性试验 无遗传毒性。

6试验方法

6．1外观 使用肉眼直接观测，应符合5．1规定。

6．2傅里叶变换红外光谱(FT IR)

样品制备采用溴化钾压片法，按照《中华人民共和国药典》(2005年版，二部)附录IV C规定的方法 测定，应符合5．2规定。

6．3葡萄糖醛酸含量测定 按照附录A规定的方法测定，应符合5．3规定。

6．4 pH值测定

透明质酸钠用蒸馏水配制成5 mg／mL浓度溶液，按照GB／T 14518规定的方法测定，应符合5．4 规定。

6．5特性粘数测定

透明质酸钠的溶液浓度以流出时间为准，应控制在120 s～180 s范围内，一般用生理盐水溶解至

1 mg／mL，按照《中华人民共和国药典}(2005年版，二部)附录ⅥG第三法测定，应符合5．5规定。

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特性粘数用以表征透明质酸钠的分子量，两者的关系见下式。

日一0．036M。78

式中： 々一特性黏数，单位为立方厘米每克(cm3／g)； M一分子量。

6．6动力粘度测定

透明质酸钠用蒸馏水配制成10 mg／mL，采用旋转式粘度计，按照《中华人民共和国药典》(2005年 版，二部)附录ⅥG第二法测定，应符合5．6规定。

6．7蛋白质含量测定 按照附录B规定的方法(可任选一种方法)测定，应符合5．7规定。

　注：库马斯亮蓝法为仲裁方法。

6．8重金属含量测定

透明质酸钠用蒸馏水配制成1 mg／mL作样品管，标准铅溶液1_0 mL于标准对照管中，按照《中华 人民共和国药典))(2005年版，二部)附录ⅧH第三法测定，应符合5．8规定。

6．9乙醇残余量测定 按照附录c规定的方法测定，应符合5．9规定。

6．10干物质含量 按照《中华人民共和国药典))(2005年版，二部)附录ⅧL规定的干燥失重法测定，所得的干物质含

量应符合5．10规定。

6．”灰分测定

精密称取透明质酸钠1．0 g，按照《中华人民共和国药典》(2005年版，二部)附录ⅧN规定的方法 测定，800℃灼烧6 h，应符合5．11规定。

6．12紫外吸收测定

透明质酸钠用生理盐水配制成l mg／mL的溶液，按照《中华人民共和国药典))(2005年版，二部)附 录ⅣA规定的方法测定，应符合5．12规定。

6．13无菌试验 按无菌操作要求按照《中华人民共和国药典))(2005年版，二部)附录ⅪH规定的方法测定，应符合

5．13规定。

6．14细菌内毒素限量试验

透明质酸钠用细菌内毒素检测用水配制成1 mg／mL，按照《中华人民共和国药典》(2005年版，二 部)附录ⅪE规定的方法测定，应符合5．14规定。

6．15原材料安全性试验

6．15．1 溶血性链球菌溶血素试验

透明质酸钠用生理盐水配制成1 mg／mL后取1 mL直接接种于血液琼脂平板培养基上，在37*(2培 养24 h，应符合5．15．1规定。

6．15．2检验检疫 针对不同的原材料，应进行不同的项目的检验检疫试验或获得相关的检验检疫证明。

6．16生物学性能

6．16．1生物学性能

按照GB／T 16886．12规定的方法制备实验样品，供下述实验使用。

6．16．2细胞毒性试验

按照GB／T 16886．5规定的方法测定，应符合5．16．2规定。

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6．16．3皮内反应试验

按照GB／T 16886．i0规定的方法测定，应符合5．16．3规定。

6．16．4急性全身毒性

按照GB／T 16886．II规定的腹腔注射方法测定，应符合S．16．4规定。

6．16．5溶血试验

按照GB／T 16886．4规定的溶血试验方法测定，应符合5．16．5规定。

6．16．6致敏试验

按照GB／T 16886．10规定的最大剂量方法测定，应符合5．16．6规定。

6．16．7皮下植入试验

按使用说明制备透明质酸溶液。采用新西兰兔3只，兔脊柱两侧各选2个植人点，每点皮下注入透 明质酸0．S mL，14 d后取样观察，其他试验步骤按照GB／T 16886．6规定的方法测定，应符合5．16．7 规定。

6．16．8遗传毒性试验

按照GB／T 16886．3规定的Ames试验、微核试验和染色体畸变试验(或小鼠精子试验)方法进行 测定，应符合5．1 6．8规定。

7检验规则

7．1 总则

透明质酸钠以同日投料，同一工艺生产的产品为同一批号。企业根据自己的生产工艺，制定相应的 出厂检验项目。

7．2型式检验

7．2．1 型式检验为全性能检验。

7．2．2型式检验时，若所有检验项目全部合格，则判定为合格，否则判定为不合格。

8标志

8．1大包装应有下列标志：

a)生产厂名和地址； b)产品名称i c)产品注册号和执行标准编号 d)规格和数量； e)生产批号或日期； f)失效日期；

g)贮存条件。

8．2小包装应有下列标志： a)产品名称； b)生产厂名和地址； c)规格和数量；

d)生产批号或日期； e)原料来源； f)失效日期； g)贮存条件。

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8．3储运标志应符合GB／T 191中的规定。

9包装、运输和贮存

9．1包装应采用适宜的包装，确保透明质酸钠产品的安全性和有效性。

9．2产品的包装、贮存、运输应符合YY／T 0313的规定。

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附录A (规范性附录) 透明质酸钠葡萄糖醛酸含量测定

A．1原理 透明质酸钠水解后，葡萄糖醛酸与咔唑试剂作用产生红紫色，生成的颜色深浅与葡萄糖醛酸含量成

正比。

　A．2设备

A．2．1 分析天平。

A．2．2 紫外分光光度计或相当设备。

A．2．3 旋涡式混合器或相当设备。

　A．3溶液制备

注：试验所用试剂均为分析纯。

A．3．1 0．1％的咔唑乙醇液

取0．1 g咔唑，加无水乙醇100 mL溶解。移至深棕色瓶中，4。C下贮存，有效期为12个月。

　A．3．2葡萄糖醛酸(GA)标准溶液

精确称取10 mg葡萄糖醛酸于100 mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，在4。C下贮存。

A．3．3 0．025 mol／L的四硼酸钠硫酸溶液

称取9．54 g的四硼酸钠(Na。B。O，·10H。O)，加入1 L浓硫酸中，加盖。不定时的振摇，直至四硼 酸钠完全溶解。室温下贮存，有效期为12个月。

A．4样品准备

取透明质酸钠约0．06 g置于50 mL容量瓶中，精确称重，加蒸馏水稀释至刻度。充分振荡混匀，使 其完全溶解，从中吸出1 mL置试管中。按式(A．1)计算样品管中透明质酸含量p。(pg／g)。

n—ml／mz (A．1)

式中： m。——透明质酸钠质量，单位为微克(pg)； mz——透明质酸钠和蒸馏水质量，单位为克(g)。

A．5测定步骤

A．5．1 按表A．1制备葡萄糖醛酸标准液系列。

表A．1 葡萄糖醛酸(GA)标准液系列浓度

试管号 O 1 2 3 4 5

GA标准溶液／mL 0 0．2 0．4 0．6 0．8 1．0

蒸馏水／mL 1．0 0．8 0．6 0．4 0．2 0

GA含量／(p-g／mL) 0 20 40 60 80 100

A．5．2 标准液系列各试管和样品试管一起置于冰水浴中，用酸式滴定管缓慢地向每管中加入

0．025 mol／L四硼酸钠硫酸(使用之前在CC冰箱内贮存至少2 h)5 mL，边加边摇匀。加毕后混匀并置

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沸水浴中煮沸20 min后取出，冷却至室温。各试管内均加入咔唑乙醇溶液O．2 mL，充分摇匀后，置于 室温(20。C±10"C)2 h。用0号管作对照，用分光光度计测定550 Elm处各标准管和样品管的吸光度。

　A．5．3 用标准管绘制吸光度～浓度曲线，根据样品管的吸光度值从标准曲线上查样品管相应葡萄糖醛 酸含量。

A．6结果表示 按式(A．2)计算透明质酸钠葡萄糖醛酸含量岛(％)。

P3一p2／Pl×100％ (A．2)

式中： P，——样品管中透明质酸钠含量，单位为微克每克(pg／g)； pz——样品管中葡萄糖醛酸含量，单位为微克每克(tLg／g)。

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附录B (规范性附录) 透明质酸钠蛋白质含量测定

B．1福林酚法 B．1．1原理

福林酚试液能够与溶液中的蛋白质发生有色反应，且其颜色深浅与蛋白质的浓度成正比。

　B．1．2设备

分析天平、紫外分光光度计或相当设备、旋涡式混合器或相当设备。

　B．1．3溶液制备

a)试剂A：称取1．0 g水合硫酸铜(CuSOt·5Hz0)，加水溶解并稀释至100 mL。

b) 试剂B：称取2．0 g水合酒石酸钾钠(KNaC。H。06·H20)，加水溶解并稀释至100 mI一。

　c)试剂c：称取25．0 g碳酸钠及5．0 g氢氧化钠，加水溶解后稀释至250 mL。

　d)试剂D：临用前，将等量的试剂A及试剂B混合。

　e)试剂E：临用前，将1份试剂D及10份试剂C混合。

　f)试剂F：临用前，取福林酚试液(Folin酚试液)进行10倍稀释。

注：实验所用试剂均为分析纯。

B．1．4标准溶液制备

B．1．4．1 精密称取经五氧化二磷真空干燥的牛血清蛋白对照品约50 mg，加水溶解并稀释至250 mL

(约200,ug／mL)。

B．1．4．2精密移取上述标准溶液0．5mL、1．0mL、2．0mL、4．0mI 5 0mL、10．0mL稀释至100mI-

(浓度约为1 ttg／mL、2 p．g／mL、4 p．g／mL、8 gg／mL、10 tLg／mL、20 btg／mL)。

B．1．5测定步骤

B．1．5．1精密移取上述各标准溶液1．0 mL，空白管精密移取蒸馏水1．0 mL，样品管精密称取透明质 酸钠0．01 g。

B．1．5．2 于上述各管中加入试剂E 1．0 mL，经旋涡振荡器混合，室温放置10 min。加入3．0 mL试剂

F，经旋涡振荡器混合后，在5CC水浴放置10 rain，于750 nm处测定吸光度。

　B．1．6结果表示

用直线回归法计算结果，按式(B．1)计算质酸钠蛋白质含量B(质量分数)：

胁一丝×100％ (B．1)

fDl

式中： n——样品管中透明质酸钠含量，单位为微克每克(rig／g)； 见——样品管中蛋白质含量，单位为微克每克(p-g／g)。

B．2库马斯亮蓝法 B．2．1原理

库马斯亮蓝G 250具有两种色调，在游离状态下呈红色，与蛋白质结合后转为青色，且其色深浅与

蛋白质的浓度成正比。

　B．2．2设备 B．2．2．1分析天平。

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B．2．2．2紫外分光光度计或相当设备。

　B．2．2．3旋涡式混合器或相当设备。

　B．2．3溶液制备

注：实验所用试剂均为分析纯。

B．2．3．1库马斯亮蓝G一250试液：称取库马斯亮蓝G 250 100 mL溶解于50 mL的95％乙醇中，再 加入85％的磷酸100 mL，并用蒸馏水稀释至1 000 mL，置于棕色瓶内，室温贮存。

　B．2．3．2蛋白质标准液：精确吸取5％人血清白蛋白标准液0．2 mL于1 000 mL容量瓶中，用蒸馏水 稀释至刻度，4 6C下贮存。

B．2．4样品准备

取透明质酸钠约0．1 g，精确称重，加蒸馏水10 mL使其完全溶解。充分振荡混匀，使其完全溶解， 从中吸出1 mL置试管中。按式(B．2)计算样品管中透明质酸含量fDl(pg／g)。

n—ml／mz×C (B．2)

式中： m。——透明质酸钠质量，单位为微克(pg)； mz——透明质酸钠和蒸馏水的质量，单位为克(g)；

c——透明质酸测定浓度值，％；

B．2．5测定步骤 B．2．5．1按表B．1制备蛋白质标准液系列。

表B．1 蛋白质标准管溶液系列浓度

试管号 1 2 3 4 5 蛋白质标准溶液／mL 0 0．1 0 2 0．4 0·8 1．0 蒸馏水／mL 1 0 0．9 0 8 0．6 0·2 0 蛋白质浓度／(,ug／mL) 0 l 2 4 8 10

B．2．5．2在标准液系列的各试管及样品试管中分别加入5 mL的库马斯亮蓝G 250溶液。用旋涡式 混合器使试管中溶液充分混合，并在室温20℃土10。C下放置15 min。用0号管作对照，用分光光度计 测定595 nm处各标准管和样品管的吸光度。

　B．2．5．3用标准管绘制吸光度一浓度曲线，根据样品的吸光度从标准曲线上查得样品管的蛋白质含量。

B．2．6结果表示 按式(B．3)计算透明质酸钠蛋白质含量p4(％)：

R—P2／I。1×100％ (B．3)

式中：

户l——样品管中透明质酸钠含量，单位为微克每克(tug／g)；

＆——样品管中蛋白质含量，单位为微克每克(pg／g)。

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附录C (规范性附录) 透明质酸钠中乙醇残留量测定 (顶空气相色谱法)

c．1原理

在一定温度下，用萃取剂——水萃取样品中的乙醇，然后顶空抽取试样通过色谱柱，使要测定的乙 醇与其他组分分开，用氢火焰离子化检测器检测，并将得到的乙醇色谱峰与外标物得到的色谱峰相 比较。

C．2设备

C．2．1 配有氢火焰离子化检测器与毛细管柱系统的气相色谱仪，要求仪器对所测定的乙醇，在最低检 测浓度下产生的信号大于仪器噪音的2倍。

C．2．2色谱数据处理机。

C．2．3石英毛细柱：SE一30 50 mX 0．53 mmX3．0 btm或相同分离效果的其他色谱柱。

C．2．4 1 000 pL微量注射器、100 pL微量注射器。

c．2．5 10 mL顶空瓶。

　C．2．6恒温干燥箱。

　c．2．7无水乙醇：色谱纯。

C．3 乙醇标准贮备液的配制

取外部干燥的100 mL容量瓶，加入约60 mL蒸馏水，加瓶塞，称重，精确到0．1 mg。用100 pL微 量注射器注入约60 pL色谱纯无水乙醇，不加瓶塞，轻轻摇匀，盖好瓶盖，称重，前后两次称重之差，即为 溶液中所含无水乙醇重量，加水至刻度配制成500 Fg／mL作为贮备液。在4"C下贮存，有效期1个月。

C．4样品制备

精密称取透明质酸钠0．1 g加0．85％生理盐水配制成1．0％的水凝胶，再从中精密称取1 g水凝胶 置于lo mL顶空瓶中，加蒸馏水l mL封盖。置于80"C恒温干燥箱中放置20 rain。

c．5操作条件

c．5．1柱温：50"C，保持2min，以10℃／min的速率升至160"(2。保持5rain。

　C．5．2汽化检测温度：180℃。

c．5．3载气：氮气，0．03 MPa，25 cm／s。

c．6测定方法

C．6．1用贮备液配制100 pg／mL～500 Fg／mL五个系列浓度的标准溶液。各取1 mL，至10 mL顶空 瓶中，加入蒸馏水1．0 mL，混匀。置于80℃恒温干燥箱中放置20 rain。

　C．6．2依次从平衡后的标准样和试样中迅速抽取顶空气体100 pL，在规定的色谱分析条件下，注入气 相色谱仪，记录峰高或面积。

注1：在一个分析中尽量一人操作，并使用同一注射器。

注2：注射器预先恒温到样品相同温度。

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注3：每一样品(包括标样)在尽可能短的时间内进行多次重复分析。在0．01 mg／mL浓度范围，相对标准偏差不大 于10％。

C．7结果计算

c．7．1用标准样所测数据，通过线性回归求出标准曲线(x：乙醇浓度，pg／mL；Y：峰高或面积)。

　c．7．2从标准曲线上求出样品相应浓度。如果所测样品结果不在标准嗑线范围内，应改变标准溶液 的浓度重新作标准曲线。

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附录D (资料性附录) 背景资料

D．1基本原理 D．1．1天然存在的聚合物在生物医学、制药和组织工程化的医药产品(TEMPs)中的应用与日俱增。

这一标准指南计划给用于这些用途的透明质酸的表征和测试参数予以指导。关于透明质酸物理和化学 性能的了解，例如分子量，将帮助最终用户选择符合他们特定用途的正确的透明质酸。这些参数的了解 同样将会确保使用者能要求和从供应者处获得与记录相类似的材料。最后，透明质酸的特性决定了透 明质酸适合某种应用或最终产品的功能性。另一些已被确认的试验也可替代本指南用于完成同一目的 的检测。而这些测试都不适合最终产品的表征和功能确认。

D．2背景

D．2．1 透明质酸是一种由葡萄糖醛酸和M乙酰氨基葡萄糖为结构单元重复交替所构成的无支链多 糖。聚合物链的长度在天然状态下的确比较长，但是在制造过程中会缩减。透明质酸是最简单的粘多 糖并且不具有硫酸盐基团。它是所有体液和组织的构成要素，在眼睛玻璃体液和关节滑液中以高浓度 存在。透明质酸溶液非常粘稠而且十分滑润。商品化透明质酸的分子量可能在100 000 g／tool至

3 000 000 g／tool之间变化，相当于大约2 500左右的聚合程度(DP)。

COONa

O

＼

H NHCOCH3

透明质酸钠结构单元 D．2．2透明质酸生产的原材料。透明质酸既可以从哺乳动物的组织中提取，也可以用微生物培养的 方法来进行商品化的生产。

　D．2．2．1哺乳动物来源。这一类包括了鸟类来源(公鸡和母鸡的鸡冠)、牛玻璃体液和牛滑液。这些

来源的透明质酸可能混有蛋白多糖。透明质酸也可以从人体的脐带中提取，但是这一来源并不适用于 大规模的商品化生产，而只用于小规模的研究。

D．2．2．2 细菌发酵。Lancefield A组和c组链球菌。天然产生一种透明质酸的粘液荚膜。另一种用 于透明质酸细菌发酵的微生物是枯草杆菌。

D．2．3新陈代谢

D．2．3．1 透明质酸在血液中的半衰期非常短，仅有几分钟。

　D．2．3．2透明质酸由各种细胞合成和分解代谢，如软骨中的软骨细胞。透明质酸在软骨中的半衰期 大约是2周～3周。表皮中的角质化细胞也能合成和分泌透明质酸。在皮肤中，透明质酸半衰期大约 为1天。

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D．2．3．3关节组织，如衬于膝关节囊内的细胞，合成透明质酸并释放到关节滑液中。滑液通过淋巴系 统再进入血液。

　D．2．3．4衬于淋巴系统内的网状内皮细胞积极的去除了几乎90％的透明质酸，剩余物再人血管系统。

　D．2．3．5测试结果表明大约占体内总含量3／3的透明质酸每24 h通过新陈代谢被替换并去除。

　D．2．4透明质酸的功能特性和应用

D．2．4．1 对于大多数生物医药应用而言，透明质酸最重要的功能特性与透明质酸的分子量有关。透 明质酸的粘性特性直接与分子量有关联。溶解性、溶胀性和粘弹性是其他一些在生物医药和制药应用 中被加以利用的特性。

D．2．4．2透明质酸的羧基基团在pI-I 7时可以完全离子化。

D．2．4．3溶液中的透明质酸使水分子和其分子上邻近的羧基以及Ⅳ乙酰基之间形成氢键，氢键的形 成导致该聚合物增进水结合能力。

　D．2．4．4眼科学。透明质酸被用于眼科粘弹性外科手术，在手术过程中提供保护和维持眼睛的形状。

　D．2．4．5骨关节炎。透明质酸能被用于替代骨关节炎关节中的滑液从而缓解疼痛。

D．2．4．6 防粘连。透明质酸被用来减少术后粘连的发生率和严重程度。

　D．2．4．7组织工程。透明质酸被作为一种基质材料用于骨修复和骨移植物。交联的透明质酸被用来 构成支架。但是，交联是一种通过引入外来分子(交联剂)来修饰透明质酸的化学反应。所形成交联的 透明质酸需要通过本标准之外所列出方法来加以测试。

　D．2．4．8化妆品和皮肤应用。透明质酸基皮肤移植物能用于提供唇部增进或修补轮廓缺陷(如皱纹

或疤痕)。透明质酸与水结合的能力也被用于许多的润肤剂配方中。

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参考文献 Eli YY 0308--2004医用透明质酸钠凝胶．

[2] ASTM F2347—-03 Standard Guide for Characterization and Testing of Hyaluronan Start—。

ing Materials Intended for Use in Biomedical and Tissue Engineered Medical Product Appli—

cations．

[3] MEDDEV 2．5 8 rev2关于含有涉及病毒和传染性病原体的动物源性材料的医疗器械的评 价的指导方针．